¿Qué es el microscopio de campo claro?
El microscopio de campo claro, o microscopio de luz, es un instrumento de laboratorio que sirve para visualizar elementos microscópicos. Es un instrumento muy sencillo de usar y también el más utilizado en los laboratorios de rutina.
Desde la aparición del primer microscopio rudimentario creado por el neerlandés Anton Van Leeuwenhoek, los microscopios han sufrido innumerables modificaciones, y no solo se han perfeccionado, sino que además han surgido distintos tipos de microscopios.
Los primeros microscopios de campo claro eran monoculares, por tanto, se observaba a través de un solo ojo. Hoy en día los microscopios son binoculares, es decir, permiten la observación a través de ambos ojos. Esta característica los hace mucho más cómodos.
La función del microscopio es ampliar una imagen muchas veces hasta visualizarla cómodamente. El mundo microscópico es infinito y este aparato permite su exploración.
El microscopio consta de una parte mecánica, un sistema de lentes y un sistema de iluminación, este último alimentado por una fuente de energía eléctrica.
La parte mecánica consta de un tubo, el revólver, los tornillos macro y micrométricos, la platina, el carro, las pinzas sujetadoras, el brazo y la base.
El sistema de lentes está formado por los oculares y los objetivos, y el sistema de iluminación consta de la lámpara, el condensador, el diafragma y el transformador.
Características del microscopio de campo claro
- Fuente de luz. Utiliza luz visible para iluminar la muestra. La fuente lumínica puede ser una lámpara halógena, LED u otra.
- Lentes objetivos y oculares. El sistema óptico del microscopio consta de varios lentes, incluyendo los objetivos, que están cerca de la muestra, y los oculares, a través de los cuales se observa la imagen aumentada.
- Aumento variable. Tienen múltiples objetivos con diferentes aumentos. La combinación del lente objetivo y ocular determina el aumento total. Los aumentos típicos van desde 40x hasta 1000x o más.
- Enfoque ajustable. El enfoque se logra moviendo el tubo del microscopio hacia arriba o hacia abajo utilizando el sistema de ajuste fino y grueso. Esto permite obtener una imagen nítida de la muestra.
- Uso en biología y ciencias afines. Se utilizan ampliamente en biología, medicina, microbiología y otras disciplinas científicas para estudiar células, tejidos, microorganismos y otros objetos transparentes.
- Técnicas especiales. Además de la observación estándar, estos microscopios pueden emplear diversas técnicas, como contraste de fase, campo oscuro, polarización y fluorescencia para visualizar diferentes aspectos de las muestras.
Partes del microscopio de campo claro
Sistema óptico
- Oculares. Los microscopios monoculares poseen un solo ocular, pero los binoculares tienen dos. Poseen lentes convergentes que amplían la imagen virtual creada por el objetivo. El ocular está formado por un cilindro que se une perfectamente con el tubo, permitiendo que lleguen los rayos de luz junto a la imagen ampliada del objetivo. El ocular consta de una lente superior llamada lente ocular y una lente inferior llamada lente colector. También posee un diafragma, y dependiendo de dónde se ubique, tendrá un nombre. El que se ubica entre ambas lentes se denomina ocular de Huygens, y si se ubica después de las dos lentes, se llama ocular de Ramsden, aunque existen muchos otros. El aumento del ocular oscila entre 5X, 10X, 15X o 20X, dependiendo del microscopio. Mediante los oculares el operador observará la imagen. Algunos modelos traen un anillo movible en el ocular izquierdo y permite ajustar la imagen. Este anillo ajustable se denomina anillo de dioptrías.
- Objetivos. Son los encargados de aumentar la imagen real que proviene de la muestra. La imagen se transmite hacia el ocular ampliada e invertida. El aumento de los objetivos varía. Generalmente un microscopio contiene de 3 a 4 objetivos. Nombrados de menor a mayor aumento son lupa, 10X, 40X y 100X. Este último se conoce como objetivo de inmersión porque necesita unas gotas de aceite para poder utilizarse, mientras que al resto se les conoce como objetivos secos. Al girar el revólver se puede pasar de un objetivo a otro, comenzando siempre por el de menor aumento. La mayoría de los objetivos lleva impresa la marca del fabricante, la corrección de curvatura de campo, la corrección de aberración, el aumento, la apertura numérica, propiedades ópticas especiales, medio de inmersión, longitud del tubo, distancia focal, grosor del cubreobjeto y anillo de código de color. Por lo general el objetivo posee una lente frontal ubicada en la parte inferior y una lente posterior ubicada en la parte superior.
Sistema de iluminación
- Lámpara. La lámpara utilizada para los microscopios ópticos es halógena, generalmente de 12 voltios, aunque las hay más potentes. Está ubicada en la parte inferior del microscopio, emitiendo la luz de abajo hacia arriba.
- Condensador. Su ubicación varía de acuerdo al modelo del microscopio. Consta de un lente convergente que condensa los rayos de luz hacia la muestra. Este se puede regular mediante un tornillo, y dependiendo de la cantidad de luz que se requiere concentrar, se puede subir o bajar.
- Diafragma. Actúa como un regulador del paso de luz. Se ubica por encima de la fuente de iluminación y por debajo del condensador. Si se quiere mucha iluminación se abre, y si se necesita poca, se cierra. De esta manera se controla cuánta luz pasará por el condensador.
- Transformador. Permite que la lámpara del microscopio sea alimentada con una fuente de poder. El transformador regula el voltaje que le llegará a la lámpara.
Sistema mecánico
- Tubo. Cilindro hueco de color negro por donde viajan los haces de luz hasta llegar al ocular.
- Revólver. Pieza que soporta los objetivos, sujetos a este por una rosca, y a la vez es la pieza que permite rotar los objetivos. Se mueve de derecha a izquierda y de izquierda a derecha.
- Tornillo macrométrico. Permite acercar o alejar el objetivo de la muestra con desplazamientos grotescos de la platina de forma vertical (arriba y abajo o viceversa). Algunos modelos mueven el tubo y no la platina. Cuando se logra enfocar no se toca más y se busca la nitidez del enfoque con el tornillo micrométrico. En los microscopios modernos el tornillo macrométrico y el micrométrico vienen con una graduación. Son más cómodos los microscopios que tienen los dos tornillos (macro y micro) en el mismo eje.
- Tornillo micrométrico. Permite el desplazamiento extremadamente fino de la platina. El movimiento es casi imperceptible y puede ser hacia arriba o hacia abajo. Este tornillo es necesario para ajustar el enfoque definitivo de la muestra.
- Platina. Es la parte donde se coloca la muestra. Posee un orificio estratégicamente ubicado para permitir el paso de luz a través de la muestra y el sistema de lentes. En algunos modelos está fija y en otros se puede mover.
- Carro. Pieza que permite que se pueda recorrer toda la preparación. Es sumamente importante, ya que la mayoría de los análisis requieren la observación de al menos 100 campos. Permite moverse de izquierda a derecha y viceversa, y de adelante hacia atrás y viceversa.
- Pinzas sujetadoras. Permiten sujetar y fijar al portaobjeto para que no se ruede la preparación mientras se mueve el carro para recorrer la muestra. Se ubica sobre la platina.
- Brazo o asa. Es el sitio por donde se debe agarrar el microscopio cuando se va a trasladar de un lugar a otro. Esta une el tubo a la base.
- Base o pie. Pieza que le da estabilidad al microscopio, permite que repose en un lugar específico sin riesgo a que se caiga. La forma de la base varía de acuerdo al modelo y marca del microscopio. Puede ser redondeada, ovalada o cuadrada.
Usos del microscopio de campo claro
- Análisis de frotis sanguíneos. El microscopio es de alta utilidad en cualquier laboratorio, especialmente en el área de hematología para el análisis de los frotis sanguíneos, contaje de glóbulos rojos, leucocitos, plaquetas, recuento de reticulocitos, etc.
- Análisis de orina y heces. Se usa en el área de orina y heces, tanto para observar el sedimento urinario como para el análisis microscópico de las heces en busca de parásitos.
- Citologías. También en el área de análisis citológicos de líquidos biológicos, como el cefalorraquídeo, ascítico, pleural, articular, espermático, secreción uretral y muestras de endocérvix, entre otros.
- Bacteriología. Es de gran utilidad en el área de bacteriología, para observar tinciones de Gram de cultivos puros y de muestras clínicas, BK, tinta china, entre otras tinciones especiales.
- Histología. Se usa para observar cortes histológicos finos, y en inmunología sirve para la observación de reacciones de floculación y aglutinación.
- Investigación. Es de mucha ayuda contar con el microscopio. Inclusive en otras áreas distintas a las ciencias de la salud, como la geología, para el estudio de minerales y rocas.
Ventajas y desventajas del microscopio de campo claro
Ventajas
- Permite una buena percepción de las imágenes microscópicas, especialmente si están teñidas.
- Los microscopios que usan lámparas de luz son más fáciles de usar y mucho más cómodos.
Desventajas
- No es muy útil para observar muestras sin teñir. Es necesario que las muestras se coloreen para poder observar las estructuras con mayor definición y así puedan contrastar con el campo claro.
- No sirve para estudiar elementos sub-celulares.
- El aumento que se puede obtener es menor al que se alcanza con otros tipos de microscopios. Es decir, cuando se utiliza la luz visible, el alcance de aumento y la resolución no son muy altos.
- Los microscopios que utilizan espejo requieren buena iluminación externa y son más complicados para enfocar.
Referencias
- Microscopio óptico. Recuperado de es.wikipedia.org.
- Sánchez, R., Oliva, N. Historia del microscopio y su repercusión en la Microbiología. Recuperado de scielo.sld.
- Valverde, L., Ambrosio, J. Técnicas de visualización de parásitos mediante microscopía. Parasitología médica. 4ta Edición. McGraw Hill.
- Arraiza, N., Viguria, P., Navarro, J., Ainciburu, A. Manual de microscopía. Recuperado de pagina.jccm.es.