¿Qué es el medio de cultivo enriquecido?
El medio de cultivo enriquecido es la combinación de un agar nutritivo como base más una sustancia o compuesto enriquecido. Los medios enriquecidos por excelencia son el agar sangre y el agar chocolate.
Ambos medios se pueden preparar con una base simple de cualquier agar nutritivo, como agar nutriente, agar soja tripticaseína, o agar infusión cerebro corazón, entre otros. Igualmente, ambos medios son suplementados con un elemento muy enriquecido que es la sangre, con la diferencia de que en el primer caso se usa desfibrinada, y en el segundo caso se usa calentada.
Estos medios no contienen inhibidores, por lo que en ellos pueden crecer una gran variedad de microorganismos, incluyendo algunas cepas exigentes desde el punto de vista nutricional. En los casos que ya son extremadamente exigentes requieren, además de sangre, otros aditivos especiales nutricionales, que deben ser añadidos al medio en el que se pretende aislar.
Por otra parte, si a un medio enriquecido se le agrega antibióticos u otra sustancia inhibidora, inmediatamente se convierte en un medio enriquecido selectivo. Estos últimos son necesarios cuando se pretende aislar microorganismos muy exigentes de una zona rica en microbiota, como Haemophilus sp y Neisseria meningitidis aislados de una muestra de exudado nasofaríngeo.
Características del medio de cultivo enriquecido
– Rico en nutrientes. Contiene sustancias adicionales como sangre, suero, extractos de tejidos animales o vegetales, que proporcionan factores de crecimiento esenciales.
– Favorece el crecimiento de microorganismos exigentes. Se usa para cultivar bacterias fastidiosas, que no crecen en medios simples o comunes.
– No inhibe el crecimiento de otros microorganismos. A diferencia de los medios selectivos, no contiene sustancias que limiten el desarrollo de ciertos microorganismos.
– Uso clínico y diagnóstico. Son fundamentales en el aislamiento de patógenos en muestras clínicas, especialmente en microbiología médica. Estos medios permiten estudiar y diagnosticar infecciones causadas por microorganismos difíciles de cultivar en condiciones estándar.
Diferencias entre medios de cultivo y medios de enriquecimiento
Es importante destacar que los medios de cultivo enriquecidos no deben confundirse con los medios de enriquecimiento. Aunque ambos contienen nutrientes y requerimientos nutricionales especiales, los medios de enriquecimiento son líquidos y se usan como pretratamiento de muestras en donde se sospeche la presencia de un tipo de bacteria patógena que se encuentra en menor proporción dentro de una mezcla polimicrobiana.
El medio de enriquecimiento inhibirá a los microorganismos que no pertenezcan a ese grupo y favorecerá el crecimiento del patógeno.
Además, tienen la propiedad de reparar daños presentes sobre la estructura celular del microorganismo que se quiere recuperar, ya que normalmente puede estar afectado por tratamientos previos recibidos y en este sentido el medio actúa aumentando su viabilidad.
Tipos de agar enriquecido y usos
El agar enriquecido más usado es el agar sangre, pero este puede ser preparado con diversas bases nutritivas y dependiendo de ello su utilidad cambia.
Por otra parte, también se encuentra el agar chocolate, que es un medio enriquecido por excelencia. Sin embargo, al igual que el agar sangre, se puede preparar con diversas bases nutritivas, además de incluir otros aditivos para el aislamiento de microorganismos exigentes.
A continuación, se realizará un resumen de las bases de agar más usadas para preparar agar sangre y agar chocolate, así como también su utilidad en cada caso.
- Agar sangre. Preparado con:
- Base de agar nutriente. Sirve para bacterias no exigentes, como enterobacterias, Pseudomonas sp, S. aureus, Bacillus sp, entre otros. No es adecuado para bacterias exigentes, como los Streptococcus.
- Base de agar infusión cerebro corazón. El agar sangre con esta base es excelente para la mayoría de las bacterias, incluyendo Streptococcus sp, pero no es recomendable para observar patrones de hemólisis. Esta combinación con ciertos aditivos es útil para determinados microorganismos. Ejemplos: Si a este medio se le adiciona cistina y glucosa, sirve para aislar Francisella tularensis. En tanto que, si se le añade cistina telurito, es útil para aislar Corynebacterium diphtheriae. Asimismo, este medio sirve para aislar bacterias del género Haemophilus, pero en este caso es necesaria la adición de bacitracina, almidón de maíz, sangre de caballo y otros suplementos de enriquecimiento como el IsoVitaleX. Finalmente, si se incluye en su preparación (cloranfenicol – gentamicina) o (penicilina – estreptomicina) con sangre de caballo, es ideal para aislamiento de Histoplasma capsulatum.
- Base de agar soja tripticaseína. Es excelente para favorecer el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, incluidos los Streptococcus sp, siendo el más recomendado para observar los patrones de hemólisis. Si se suplementa con cistina telurito y sangre de cordero es ideal para Corynebacterium diphtheriae.
- Base de agar Müeller Hinton. Ideal para antibiogramas de microorganismos complicados como el Streptococcus sp, así como para aislamiento de Legionella pneumophila.
- Base de agar Thayer Martin. Es ideal para aislar la especie Neisseria meningitidis.
- Base de agar Columbia. Es especial para el aislamiento de Helicobacter pylori y Gardnerella vaginalis. Para mayor éxito se adicionan distintos tipos de antibióticos para inhibir la microbiota acompañante.
- Base de agar Brucella. La combinación de sangre de cordero, vitamina K y agar Brucella es excelente para el cultivo de bacterias anaerobias.
- Base de agar Campylobacter. Como su nombre lo indica, esta base sirve para aislar Campylobacter jejuni en muestras de heces. Para ello se suplementa con 5% de sangre de carnero y cefalotina, anfotericina B, trimetoprima, polimixina B y vancomicina.
- Agar chocolate. Preparado con:
- Base de agar Columbia. La preparación del agar chocolate con esta base es muy utilizada para aislar bacterias del género Neisseria. También es recomendada para el aislamiento de Brucella sp, pero para ello se debe adicionar vitamina K y usar sangre de caballo.
- Base de agar base GC. Es una de las bases recomendadas para hacer agar chocolate, especialmente para el aislamiento de gonococos.
- Base de agar Müeller Hinton. Algunos microorganismos exigentes, como el Streptococcus pneumoniae, necesitan este medio para poder realizar la prueba de susceptibilidad antimicrobiana. También es útil en el aislamiento de Neisserias y Haemophilus, con la salvedad de que el género Haemophilus prefiere sangre de caballo, ya que es rica en factor X (hemina) y V (NAD). En ocasiones es aconsejable incluir antibióticos en su preparación para inhibir la microbiota acompañante.
- Base con agar Thayer Martin. Se recomienda el uso de sangre de cordero para preparar el agar chocolate con esta base. Este medio es especial para el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae. Se adicionan antibióticos para inhibir la microbiota acompañante.
Referencias
- Prescott, M., Harley, P., Klein, A. Microbiología, 4ta. McGraw Hill Interamericana,
- Forbes, B., Sahm, D., Weissfeld, A. Diagnóstico Microbiológico de Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A.
- Koneman, E., Allen, S., Janda, W., Schreckenberger, P., Winn, W. Diagnóstico Microbiológico. (5ta ed.). Editorial Panamericana S.A.
- Jawetz, E., Melnick, J., Adelberg, E. Microbiología Médica. (14 edición), Editorial El Manual Moderno.
- González, M., González, N. Manual de Microbiología Médica. 2da edición, Dirección de medios y publicaciones de la Universidad de Carabobo.