¿Qué son los medios de cultivo selectivos?
Los medios de cultivo selectivos son agares y caldos que sirven para el aislamiento de un grupo definido de microorganismos, mientras inhiben el desarrollo de otros. Son ideales para sembrar muestras polimicrobianas, permitiendo recuperar el patógeno buscado entre la microbiota acompañante.
Existe una gran variedad de medios selectivos, entre sólidos y líquidos. Algunos van destinados al aislamiento de bacterias grampositivas, como Staphylococcus coagulasa positivos, Lactobacillus, Bifidobacterias, etc.
Otros, para la recuperación de patógenos gramnegativos, como especies de los géneros Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas, entre otros.
También los hay para favorecer el crecimiento de hongos y levaduras, como especies de Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatofitos, entre otros.
Algunos medios enriquecidos no selectivos pueden convertirse en selectivos con la adición de antibióticos. Y algunos medios de cultivos pueden ser selectivos y diferenciales al mismo tiempo.
Por otra parte, existen medios de cultivo líquidos selectivos. Algunos pueden servir como medios de enriquecimiento, favoreciendo la exacerbación de un grupo selectivo de bacterias, mientras suprime el de otros.
Los medios de cultivo selectivos son ampliamente utilizados en los laboratorios de microbiología para el análisis de diversos tipos de muestra, y también para el aislamiento de una gran variedad de microorganismos de interés clínico, industrial, ambiental y alimentario.
Fundamento de los medios de cultivo selectivos
Estos medios contienen sustancias nutritivas que favorecen el crecimiento de una bacteria u hongo específico o de un grupo determinado de estos, y al mismo tiempo, sustancias inhibidoras que no permiten el desarrollo de otros microorganismos no deseables.
Entre las sustancias nutritivas que pueden contener se encuentran: digerido pancreático de caseína, extracto de levaduras, polipeptonas, entre otros.
Entre las sustancias inhibidoras se encuentran: antibióticos, sales biliares, verde brillante, cristal violeta, fucsina básica, eosina, azul de metileno, desoxicolato sódico, sulfito sódico, monoleato de sorbitán, citrato de amonio, cetrimida, cloruro de litio, telurito de potasio, verde de malaquita, entre otros.
En ocasiones, los medios pueden ser tanto selectivos como diferenciales. Y el grado de selectividad varía de un medio a otro.
Algunos son altamente selectivos, caracterizados por poseer condiciones extremas de hostilidad para la mayoría de los microorganismos y donde solo un pequeño número de especies son capaces de soportar las condiciones presentes en el medio, y por tanto crecen satisfactoriamente. Por ejemplo, el agar TCBS y el agar MRS, entre otros.
En tanto que otros son medianamente selectivos, es decir, inhiben a un grupo específico de microorganismos, como por ejemplo, bacterias grampositivas. Por otra parte, favorecen el crecimiento de una gran variedad de bacterias gramnegativas, por ejemplo, el agar Mac Conkey.
Finalmente, existen medios de cultivo con un bajo poder selectivo, es decir, que permiten el crecimiento de una gran variedad de bacterias, entre grampositivas y gramnegativas, así como también de algunas levaduras, mientras inhiben solo un pequeño grupo de microorganismos. Ejemplo: el agar EMB.
Medios de cultivo sólidos selectivos
Agar Baird-Parker
Diseñado para la detección de estafilococos coagulasa positivos (Staphylococcus aureus). Contiene como sustancias inhibidoras cloruro de litio y telurito de potasio.
Agar BCYE o agar tamponado de extracto de levadura y carbón
Medio de cultivo muy enriquecido, especialmente para el aislamiento de especies de Legionellas y Nocardias. Este medio se vuelve selectivo con la adición de antimicrobianos, como polimixina B, vancomicina y anisomicina.
Agar BHI con antibióticos
Originalmente es un medio enriquecido, pero si se le adiciona cloranfenicol y cicloheximida es ideal para el aislamiento selectivo de hongos de interés clínico.
Agar BIGGY o agar Nickerson
Medio selectivo y diferencial para el aislamiento de especies de Candida. Contiene citrato de amonio, bismuto y sulfito de sodio, que actúan como inhibidores del crecimiento bacteriano.
Agar Bordet Gengou
Medio de cultivo enriquecido y selectivo, especialmente para el aislamiento de Bordetella pertussis y Bordetella parapertussis. Contiene cefalexina para inhibir la flora acompañante.
Agar Campy con sangre
Utilizado para el aislamiento del género Campylobacter. Contiene cefoperazona, vancomicina y anfotericina B para inhibir el crecimiento de bacterias gramnegativas, grampositivas y hongos.
Agar Campylobacter Butzler
Especial para el aislamiento de especies del género Campylobacter. Está suplementado con sangre de caballo, entre otros nutrientes. También contiene diversas sustancias inhibidoras, como novobiocina, colistina, cefazolina, bacitracina y cicloheximida.
Agar Campylobacter Skirrow
Medio selectivo para el aislamiento de especies de Campylobacter. Contiene sangre de caballo y otros nutrientes. Como sustancias inhibidoras contiene vancomicina, polimixina B y trimetoprim.
Agar CCF o agar fructosa, cicloserina, cefoxitina
Contiene cicloserina y cefoxitina como sustancias inhibidoras y es utilizado para el aislamiento de Clostridium diffcile en muestras de heces, entre otras muestras intestinales.
Agar cetrimida
Diseñado para el aislamiento de Pseudomonas aeruginosa, favoreciendo la producción de pigmentos. La cetrimida (bromuro de cetil trimetil amonio) es la sustancia que inhibe el crecimiento de otras bacterias diferentes a P. aeruginosa.
Agar chocolate con isovitalex y vancomicina
La adición de vancomicina es útil para el aislamiento selectivo de cepas de Neisseria gonorrhoeae y N. meningitidis.
Agar CIN o agar cefsulodina, irgasán, novobiocina
Medianamente selectivo para el aislamiento de especies de Yersinia.
Agar CNA (colistina, ácido nalidíxico)
Especial para aislamiento de bacterias grampositivas como Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus y levaduras, pero inhibe el desarrollo de bacterias gramnegativas como Pseudomonas y especies de la familia Enterobacteriaceae.
El agar Czapek
Diseñado para el cultivo de bacterias y hongos saprófitos. Contiene nitrógeno de tipo inorgánico. Por este motivo este medio se considera selectivo, pues solo podrán desarrollarse microorganismos capaces de utilizar compuestos inorgánicos como única fuente de nitrógeno.
Agar EMB
Ligeramente selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento de enterobacterias. Escherichia coli es especialmente detectada en este medio por el color negro verdoso brillante de sus colonias. El grado de selectividad que posee es debido a la presencia de los colorantes anilínicos (eosina y azul de metileno).
Agar Endo
Mínimamente selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos gramnegativos fermentadores y no fermentadores de la lactosa, pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae y a otras familias.
El sulfito sódico y la fucsina básica inhiben la mayoría de las bacterias grampositivas. Escherichia coli en este medio produce colonias características de color rojo oscuro con un brillo metálico verdoso tornasolado.
Agar Hektoen
Medio selectivo y diferencial para el aislamiento de bacterias enteropatógenas de los géneros Shigella y Salmonella. Como sustancia inhibidora contiene sales biliares, suprimiendo el desarrollo de bacterias grampositivas y algunas gramnegativas.
Agar Löwenstein-Jensen
Especialmente diseñado para el aislamiento y desarrollo de bacterias del género Mycobacterium, especialmente la especie M. tuberculosis, entre otras.
Contiene verde de malaquita, que inhibe la flora acompañante grampositiva y gramnegativa que haya podido resistir a la desinfección previa de la muestra. También contiene glicerina que estimula el crecimiento de M. tuberculosis, pero inhibe el desarrollo de M. bovis y de otros microorganismos.
Agar Mac Conkey
Medio selectivo y diferencial. Se utiliza para el aislamiento de bacilos gramnegativos no exigentes, fermentadores y no fermentadores de la lactosa.
Su carácter selectivo se debe a la presencia de sales biliares y cristal violeta. Estas sustancias inhiben el crecimiento de bacterias grampositivas y algunos bacilos gramnegativos exigentes.
Agar manitol salado
Agar selectivo y diferencial para el aislamiento de Staphylococcus aureus. Posee una alta concentración de cloruro de sodio que inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias.
Agar SS
Moderadamente selectivo y diferencial para el aislamiento de los géneros Salmonella y Shigella. El medio contiene sustancias inhibidoras, como sales biliares, citrato de sodio y verde brillante. Estas sustancias suprimen el crecimiento de bacterias grampositivas, ciertas bacterias gramnegativas y algunos coliformes.
Agar Regan Lowe
Selectivo para el aislamiento de Bordetella pertussis. El medio contiene carbón, cefalexina y anfotericina B como sustancias inhibidoras.
Agar SABHI
Selectivo para el aislamiento de hongos patógenos, como dermatofitos, Blastomyces dermatitidis e Histoplasma capsulatum. Contiene cloranfenicol.
Agar sangre de caballo con bacitracina
Especial para el aislamiento de Haemophilus influenzae. La bacitracina inhibe la flora acompañante.
Agar sangre de caballo con carbón
Selectivo útil para recuperar cepas de Bordetella pertussis y B. parapertussis a partir de muestras clínicas. Contiene cefalexina para inhibir la flora acompañante.
Agar sangre kanamicina-vancomicina (KV)
Selectivo, especial para el aislamiento de bacterias anaerobias, como Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium y Veillonella.
Agar sulfito de bismuto
Selectivo para el aislamiento de Salmonella enterica subgrupo enterica serotipo Typhi. Este medio contiene sulfito de bismuto y verde brillante para inhibir el crecimiento de microorganismos grampositivos y ciertas bacterias gramnegativas.
Agar TCBS (tiosulfato, citrato, sales biliares)
Altamente selectivo para el aislamiento de especies del género Vibrio. Contiene citrato de sodio, bilis de buey y un pH alcalino que inhibe la flora acompañante.
Agar Thayer-Martin
Altamente nutritivo y selectivo para el aislamiento de Neisseria meningitidis y Neisseria gonorrhoeae. La flora acompañante se inhibe por la presencia de vancomicina, colistina y nistatina.
Agar verde brillante
Selectivo para el aislamiento de cepas del género Salmonella. Contiene verde brillante como sustancia inhibidora, que impide el desarrollo de bacterias grampositivas y un gran número de microorganismos gramnegativos.
Agar Vogel-Johnson
Medio de cultivo selectivo y diferencial, formulado para el aislamiento de Staphylococcus aureus e inhibe el crecimiento de bacterias gramnegativas e incluso algunas grampositivas. Las sustancias inhibidoras son el telurito de potasio, el cloruro de litio y la glicina.
Agar XLD
Medio selectivo y diferencial para el aislamiento de enteropatógenos Salmonella y Shigella. El desoxicolato sódico le brinda el carácter selectivo al medio.
CHROMagar (M)
Medio selectivo y diferencial para ayudar al aislamiento e identificación de especies de Candida. El medio contiene cloranfenicol para inhibir el desarrollo de bacterias.
Medio Ellinghausen McCulough Johnson y Harris (EMJH)
Medio selectivo para el cultivo de Leptospiras. Contiene polisorbato 80, que inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias.
Medios de cultivo líquidos selectivos
Caldo BHI NaCL 6,5%
Para recuperación de Enterococcus. La alta concentración de cloruro de sodio inhibe el crecimiento de la microbiota acompañante.
Caldo EC
Caldo selectivo para la recuperación de coliformes fecales y totales. Contiene sales biliares que inhiben el crecimiento de otros microorganismos.
Caldo GN
Caldo selectivo para recuperar Salmonella y Shigella. Contiene citrato de sodio y desoxicolato sódico, que inhiben a las bacterias Gram positivas y a los coliformes.
Caldo Rappaport-Vassiliadis
Medio de enriquecimiento selectivo de especies de Salmonella. Contiene verde de malaquita como sustancia inhibidora.
Caldo selenito
Útil para el enriquecimiento de muestras en donde se sospecha la presencia de bacterias enteropatógenas del género Salmonella. Contiene selenito de sodio como sustancia inhibidora, suprimiendo el crecimiento de bacterias grampositivas y de la mayoría de las bacterias del tracto gastrointestinal.
Caldo tetrationato
Útil para el enriquecimiento y recuperación de cepas del género Salmonella. El tetrationato formado por la reacción generada entre el tiosulfato de sodio y la solución iodurada presente en el medio inhibe el crecimiento de coliformes y favorece el desarrollo de bacterias que contienen la enzima tetrationato reductasa (Salmonella).
También contiene sales biliares y algunas variedades incluyen el verde brillante, ambas inhiben la mayoría de las bacterias grampositivas y algunas gramnegativas (coliformes).
Caldo tioglicolato Campy
Especial para favorecer el desarrollo de C. jejuni subsp jejuni. Contiene anfotericina B, cefalotina, polimixina B, trimetropim y vancomicina.
Caldo Todd-Hewitt con sangre y antibióticos
Sirve para enriquecer las muestras y favorecer el desarrollo de Streptococcus agalactiae de secreciones vaginales. Como sustancias inhibidoras contiene ácido nalidíxico y gentamicina o colistina.
Referencias
- Microbiología clínica medios de cultivo (curso 2012-2013). Recuperado de asignatura.us.es.
- Agar Campylobacter Skirrow y Agar Campylobacter Butzler. Recuperado de bd.com.
- Löwenstein-Jensen. Recuperado de bio-rad.com.
- Caldo GN (Hajna). Recuperado de foodsafety.neogen.com.
- CHROMagar. Candida Medium. Recuperado de bd.com.